淋球菌感染的实验室诊断

一、标本质量控制

1、取材部位正确

淋球菌的易感细胞为柱状上皮细胞，男性的尿道舟状窝和女性宫颈外膜及阴道壁为复层扁平上皮细胞，不是淋球菌的易感细胞。

2、取材拭子

藻酸钙拭子、普通拭子、涤纶拭子均可

3、取材部位

根据患者年龄、性别、性接触方式及临床表现决定适合的取材部位。

同一患者多处取材可提供其检出阳性率。

男性异性恋者，一般采集尿道标本，有口交史者加采咽部标本；**性接触患者采集尿道、直肠及咽部标本；女性患者采集宫颈标本，必要时采集尿道、直肠、咽部、前庭大腺及尿道旁腺标本；幼女患者采集阴道分泌物；播散性淋菌性感染患者，采集尿道分泌物外，还可采集血液、关节腔液、皮损标本；新生儿眼炎患者可采集眼分泌物及其母亲的宫颈、尿道或直肠标本。

4、取材方法

尿道：男性患者，用生理盐水冲洗尿道口，将男用拭子插入尿道内cm，稍用力转动，保留数秒后取出。女性患者，可抵着耻骨联合轻轻按摩尿道后，用同男性相似方法取材。

宫颈：用温水或生理盐水湿润扩阴器，禁用防腐剂及润滑剂。如果宫颈口外分泌物过多，先用无菌拭子清除过多的分泌物，后将女性拭子插入宫颈管内cm，旋转保留s后取出。

直肠：拭子插入肛管cm，向侧方用力，避免接触粪团，从紧靠肛环边的隐窝中取出分泌物，如拭子碰到粪团后，应重新取材。

阴道：对青春期女孩后或子宫切除的妇女可采集阴道分泌物，拭子置于阴道后穹窿s，采集阴道分泌物。如果处女膜完整，从阴道口取材。

咽部：咽喉壁或扁桃体隐窝为采集分泌物部位。

血液：抽取后立即接种于不含多茴香脑硫酸钠的血液培养基上，或肝素抗凝血离心后，取白细胞层，接种于淋球菌培养基中。

皮损或关节腔积液：注意肝素化处理标本后接种。

5、标本运输或传递：淋球菌在外界的抵抗力低，对热敏感，不耐干燥，自溶现象明显。因此注意保温运输。如非营养运输标本，应不超过12h接种。

二、实验室诊断

1、革兰染色涂片：镜下观察白细胞内外有无革兰染色阴性双球菌。

涂片均匀、厚度适当、涂膜固定、加热适量、脱色彻底、油镜观察、胞内双球、男女区分报告、男性特异性％、女性敏感度％、镜检阳性需做培养

2、分离培养：培养基密封4℃保存，贮藏时间不超过3周以上，初次培养以5％二氧化碳环境36℃左右培养。（烛缸培养，需用白色无芳香味的无毒蜡烛）培养h后方可报告阴性。如果培养阳性可做菌落鉴定结果。

3、初步鉴定菌落形态特征：圆形、凸起、润泽、粘性感、光滑、半透明至灰白色。24h巧克力培养基菌落大小0.mm，48h后mm大小，菌落边缘平滑或菜花状，表面粗糙。

4、氧化酶试验：阳性，但非特异性。

5、革兰染色：观看染色后形态特征。

6、糖发酵试验：淋球菌仅分解葡萄糖，不分解其他糖类，脑膜炎奈瑟菌可分解葡萄糖及麦芽糖。

7、荧光抗体染色：荧光显微镜下观察。（染色涂片注意避光，湿盒内保存，或锡箔纸4℃保存）

8、DNA技术鉴定：用于分型及深度研究。